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本發(fā)明公開了一種哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)載體、表達(dá)系統(tǒng)、制備方法和應(yīng)用，屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域。該表達(dá)載體包含TOP1 MAR序列(GenBank：L23999.1)，通過將外源目的基因插入載體的多克隆位點(diǎn)，能夠構(gòu)建TOP1 MAR?啟動(dòng)子?外源基因?Poly A、啟動(dòng)子?外源基因?Poly A?TOP1 MAR或者TOP1 MAR?啟動(dòng)子?外源基因?Poly A?TOP1 MAR載體結(jié)構(gòu)，一方面克服轉(zhuǎn)基因沉默，另一方面介導(dǎo)外源基因在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定、高效、持久表達(dá)。同等條件下，與不含MAR以及含1?68 MAR的載體相比，本發(fā)明中表達(dá)載體能顯著提高外源基因的表達(dá)水平，可用于重組蛋白的生產(chǎn)等。

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